熒光定量PCR技術(shù)簡介   

     我室自1996年開展了常規(guī)PCR技術(shù)，雖然具有很高的特異性和靈敏性，但仍有一些缺陷：①由于采用終點(diǎn)法檢測，無法實(shí)現(xiàn)定量檢測；②采用電泳法觀察結(jié)果，極易造成污染；③不易進(jìn)行質(zhì)控；④結(jié)果判斷有時(shí)會(huì)受非特異性擴(kuò)增帶的干擾等等，傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床的需要。
    近日我室引進(jìn)國內(nèi)最先進(jìn)的熒光定量PCR檢測系統(tǒng)，它是國際上最新研制的一種核酸定量技術(shù)，該技術(shù)在PCR反應(yīng)系統(tǒng)中引入了熒光標(biāo)記探針，具有高靈敏性、高特異性、和高精確性的特點(diǎn)。目前已被應(yīng)用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達(dá)、突變和多態(tài)性研究等多個(gè)領(lǐng)域。
    熒光定量PCR（簡稱FQ-PCR）由美國PE公司1995年研制成功，該技術(shù)是在常規(guī) PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針來實(shí)現(xiàn)其定量功能的，與普通PCR相比，F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點(diǎn)：
1、 封閉反應(yīng)，無需PCR后處理。
2、 特異性強(qiáng)，靈敏度高。
3、 采用對(duì)數(shù)期分析，摒棄終點(diǎn)數(shù)據(jù)，定量準(zhǔn)確。
4、 定量范圍寬，可達(dá)到10個(gè)數(shù)量級(jí)。
5、 儀器在線式實(shí)時(shí)檢測，結(jié)果直觀，避免人為判斷。
6、 可實(shí)現(xiàn)一管雙檢或多檢。
7、 操作安全，縮短時(shí)間，提高效率。
    熒光定量PCR是一個(gè)方法，我們可根據(jù)臨床科室的不同要求開展檢測項(xiàng)目歡迎臨床醫(yī)生積極與我們聯(lián)系，以有利于疾病的診斷和科研課題的研究。目前已開展的檢測項(xiàng)目有：乙肝病毒DNA定量檢測（靜脈血2毫升、乳汁2毫升）
巨細(xì)胞病毒DNA定量檢測（靜脈血2毫升）
肺炎支原體DNA定量檢測（靜脈血2毫升）
生殖道淋球菌DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
生殖道沙眼衣原體DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
生殖道解脲支原體DNA定量檢測（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
人乳頭瘤病毒DNA定量檢測（ HPV-6，-11，-16，-18）（分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水）
        2005.04.01